断肠草提取物对小鼠的急性毒杀研究

　　【摘要】

　　目标探讨断肠草提取物对小鼠的毒力作用.

　　方法灌胃法.

　　结果断肠草提取物对小鼠存在很强的鸩杀作用.一次性注射0.5m

　　L、浓度为0.003、0.004、0.005g/ml的断肠草提取物时，小鼠在30min内的逝世亡率分辨为8.33%、41.67%、100%.同时，断肠草提取物对小鼠的鸩杀作用敏捷.当浓度为0.005g/ml时，小鼠在20min内全部逝世亡，均匀致逝世时光为12.8min；浓度为0.004g/ml时，试鼠在28min内逝世亡了5只，残余的2d内未见逝世亡；浓度为0.003g/m，l试鼠在16min时逝世亡1只，残余的2d内仍未见逝世亡.中毒小鼠均表示出活动缓慢，步调不稳，身材抽搐，肤色变黑等一些症状.

　　论断断肠草提取物对小鼠鸩杀作用明显，所需剂量少，致逝世时光短，为开动员物性灭鼠剂供给了技巧参考.

　　鼠类不仅品种多、个体数量多，而且成长发育快，存在强盛的滋生力、散布广、迫害重大等.目前防治鼠害的方法重要有化学灭鼠、生物灭鼠、人工机械灭鼠等.长期以来利用最多、最广的为化学灭鼠.但化学灭鼠会使害鼠易产生耐药性跟拒食性，导致防效降落，且造成环境沾染，产生二次中毒[1].断肠草（GelesemiumelegansBenth）属马钱科（Logani-

　　aceae）胡蔓藤属（Gelesemium），俗名大茶药、胡蔓藤等，为多年生常绿藤本动物.断肠草在医药、畜牧业跟农业方面都有开发跟利用[2-3]，尤其在医药方面开发利用的很多，研究表明断肠草有抗肿瘤、免疫调节、镇痛、医治皮肤病、扩瞳等作用.断肠草含多种钩吻碱，有剧毒，民间常用作杀虫剂，故亦名"菜虫

　　药".骆悦等[4]发明，断肠草甲醇粗提物及断肠草

　　生物碱对福寿螺幼螺跟成螺有良好的把持作用.然

　　而断肠草对害鼠的研究鲜见报道，本文抉择断肠草

　　提取物，研究对小鼠的毒力作用，为进一步研制动物

　　性杀鼠剂供给技巧参考.

　　1资料与方法

　　1.1小鼠实验于2010年3~4月在广东省惠州南生成物科技有限公司进行.实验小鼠取自该公司养殖的昆明种小鼠，滋生多代，选取体重18~22g的健康小鼠做为实验对象.

　　1.2断肠草乙醇提取物（膏状）由惠州南生成物科技有限公司经索氏抽提提取并供给.

　　1.3试剂75%乙醇，蒸馏水等，市售.

　　1.4仪器电子天平、注射器、棕色小瓶、量筒、烧

　　杯、玻璃棒.

　　1.5方法采取灌胃法[5]，操作步骤如下：以左手捉持小鼠，使腹部朝上，颈部拉直.右手持灌胃管（由1~2ml注射器上连接磨去针尖的针头制成）.灌胃管长约4~5cm，直径约1mm，先从小鼠口角插进口腔内，而后用灌胃管压其头部，使口腔与食道成始终线.再将灌胃管从舌面紧沿上腭进入食道，灌胃管插入约1/2处将药液注入.若遇阻力，应退出灌胃管再插入，留神操作时动作要轻.

　　1.6断肠草提取物毒性实验

　　1.

　　6.1断肠草提取物药液的配制用电子天秤称取断肠草提取物1g，用10ml的20%乙醇溶解，搅拌均匀，配制成浓度为0.1g/ml的断肠草提取物母液，盛于棕色小瓶中，放入4%冰箱保存.利用时以10倍梯度浓度稀释母液，分辨配制成0.1、0.01跟0.001g/ml3个浓度药液.

　　1.

　　6.2断肠草提取物毒性料想定将小鼠按A（0.1g/ml）、B

　　（0.01g/ml）、C

　　（0.001g/ml）分为3组，每组4只小鼠，禁食12h后用灌胃法对小鼠一次性注射0.5m，l而后畸形豢养，察看小鼠的反应，记录小鼠逝世亡时光及逝世亡数量.每个组重复3次.

　　1.

　　6.3断肠草提取物毒性测定随机选取48只小鼠，按A

　　（0.005g/ml）、B

　　（0.004g/ml）、C

　　（0.003g/ml）、D

　　（0.002g/ml）分为4组，每组4只试鼠，重复3次，实验方法同

　　1.

　　4.2.

　　1.

　　6.4小鼠中毒反应察看灌胃后5d内察看记录各组小鼠在注射后的反应及中毒症状.

　　2结果与剖析

　　2.1鸩杀预实验测定灌胃0.5ml断肠草提取物对小鼠的鸩杀料想定结果见表1.0.1g/ml断肠草提取物处理后，小鼠在12min内全部逝世亡，均匀致逝世时光为7.4min；注射灌胃断肠草提取物0.01g/m，l小鼠在21min内全部逝世亡，均匀致逝世时光为13.3min；而灌胃断肠草提取物0.001g/ml时，在2d内未见小鼠逝世亡.同时还可看出，当提取物浓度在0.01g/ml以上时，随着浓度的增加小鼠逝世亡时光缩短.由此表明，断肠草提取物在浓度达0.01g/ml以上时对小鼠有较强的鸩杀作用.故毒性实验中采取0.01~0.001g/ml浓度进行测定.

　　2.2毒性实验结果灌胃0.5ml断肠草提取物对小鼠的毒性实验结果（表2）.当灌胃浓度为0.005g/ml时，试鼠在20min内就全部逝世亡，均匀致逝世时光为12.8min；当灌胃浓度为0.004g/ml时，试鼠在28min内逝世亡了5只，残余的2d内未见逝世亡；当灌胃浓度为0.003，试鼠在16min时逝世亡1只，残余的2d内未见逝世亡；灌胃浓度为0.002g/ml时，2d内均未见小鼠逝世亡.

　　从表2中可看出，小鼠的逝世亡率随着浓度的降落而降落，逝世亡时光也向后推迟.灌胃浓度在0.005g/ml以上，小鼠在20min内全部逝世亡.灌胃浓度为0.003g/ml以上时，28min内小鼠逝世亡率为41.67%.灌胃浓度达0.003g/ml时，小鼠的逝世亡率很低，仅为8.33%，表明对小鼠有明显鸩杀作用的浓度为0.003~0.005g/m，l且在这可致逝世浓度范畴内，随着作用剂量的增加，小鼠的致逝世时光缩短.

　　2.3小鼠中毒症状察看灌胃后，最初小鼠无异样；5min左右，小鼠活动缓慢，步调不稳，蜷缩着，头部开端抽动，缓缓地小鼠全身颤抖；再过一段时光后，小鼠开端活泼跳动，在鼠笼内到处窜跳，颤抖更加厉害；濒临逝世亡时，小鼠连续挣扎，前腿不动蹬后腿，1min左右抽搐不止直至逝世亡.同时，小鼠在挣扎进程中，身材肤色由原来的粉红色逐步变黑，眼睛外突.此外，察看还发明，有些小鼠在后期会呈现磨牙景象.

　　3论断

　　研究结果表明，断肠草提取物对小鼠鸩杀作用明显，存在急性致逝世的后果.在可致逝世浓度范畴内，随着灌胃浓度的增加，小鼠的致逝世时光减少，个别致逝世时光约30min.当断肠草提取物浓度在0.005g/ml以上时，20min内小鼠全部逝世亡.同时灌胃后小鼠存在一个短暂的埋伏期，约5min左右.之后，小鼠则开端表示出一些全身颤抖、抽搐等症状，直至逝世亡.据研究报道，断肠草植株中含有的活性成分叫钩吻碱，属于吲哚类碱，植株各局部生物碱的含量以根皮部（1.5%~2.2%）为最高，茎皮（1%~1.1%）次之，茎含量为0.4%~0.5%，叶含量仅0.3%[3].这为下一步分别跟提纯杀鼠活性成分，为断肠草作为动物源灭鼠剂的开发供给了依据.

　　在实际防控工作中，因为化学药物一直呈现抗性、公害等问题，人们越来越偏向于从天然物质中寻找更保险、更有效的活性物质，以开发新型的动物源农药.动物性农药来源于天然，有其顺畅的降解途径，无残毒遗留，不沾染环境，不易产生抗药性，因此受到普遍关注.韩崇选等[6]对多种动物进行了杀鼠活性的测定，发明曼陀罗、苦参、铁棒锤等动物对试鼠存在较强的鸩杀活性，且无二次中毒景象产生.詹绍琛等[7]用闹羊花进行灭鼠实验，表明闹羊花叶煎剂灌服或毒饵试鼠都有较强的毒性.张美文等[8]将烟草水煮液与玉米粉、面粉饵料按一定的比例制成的毒饵豢养小鼠，表明烟草对鼠类也存在较好的鸩杀作用.我国动物质源极为丰富，对动物源农药的研究历史久长，有丰富的教训跟深沉的基本.因此，研究与开发保险性高的动物性灭鼠剂，将成为现今新型灭鼠剂研制的热点，对解决当前化学灭鼠剂所引起的社会跟环境问题存在重要的意思.

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